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Elisa試劑盒檢測抗生素的原理
點擊次數:786 更新時間:2019-10-28
       氨基糖類、四環素類、喹諾酮類、硝基呋喃類等。目前國內外可以用ELISA方法檢測的抗生素有:、、四環素、、呋喃它酮、、、泰樂菌素、磺胺喹惡啉、、鹽霉素、磺胺類、阿維霉素、ELISA試劑盒檢測成本低靈敏度高檢測限通常可以達到*,是一種理想的初篩方法。但由于ELISA方法存在一定的假陽性率,因此用美聯免疫吸附法測定的陽性樣品必須做進一步的確定實驗。
  現在已ELISA試劑盒檢測為例介紹;本試劑盒適用于牛奶、肉類、魚、蝦、血清、及蜂蜜中的殘留量的測定。
  (一)測定原理
  測定的基礎是抗原抗體放映。微孔板包被有針對兔IgG(抗體)的羊抗體。加入抗體、標記物、標準或樣品溶液、游離與酶標記物競爭抗體,同時抗體與羊抗體連接。沒有連接的酶標記物在洗滌步驟中被去除。將酶基質(過氧化尿素)和發色劑(四甲基聯苯胺)加入到空中并且孵育。結合的酶標記物將無色的發色劑轉化為藍色的產物。加入反應停止液后使眼色由藍色轉變為黃色。在450nm處測量,吸收光強度與樣品中的濃度成正比
  (二)試劑盒指標
  特異性
  通過對形影的物質進行交叉反應性分析得到
  00%堿0.5%<0.05%
  余四環霉素變暗霉素無交叉反應
  回收率
  牛奶>80%魚蝦肉>80%
  蜂蜜>80%蛋類>80%
  (三)提供的試劑
  、96孔(2條*8孔)包被有羊抗體。
  2、濃縮標準液;為標準溶液。
  3、過氧化物酶標記的濃縮液:0.7mL
  4、抗體濃縮液0.7ml
  5、基質(7ml)含有氧化尿素
  6、四甲基聯苯胺(TMB)30%過氧化氫,牛血清白蛋白,圖文20等
  7、反應停止液mol/L硫酸
  8、緩沖液:00ml用于標準酶標記物抗體樣品稀釋
  9、緩沖液2:ml,用于測定牛奶樣品時的標準稀釋用緩沖液

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