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ELISA常用方法對比
點擊次數:966 更新時間:2016-10-18

 ELISA常用方法對比

我們知道,ELISA可分為多種類型測定,是一種廣泛應用在測定液體樣本中的蛋白、抗體、或激素的免疫分析技術。 我公司技術部將各種ELISA常用方法的優勢劣勢進行對比,結果如下:

 

一、間接法:此測定方法與直接法類似,差別在于一級抗體沒有酶標記,改用酶標記的二級抗體去辨識一級抗體來測定抗原量。

優勢:二抗可以加強信號,而且有多種選擇能做不同的測定分析。不加酶標記的一級抗體則能保留它zui多的免疫反應性。

劣勢:交互反應發生的機率較高。

二、雙抗體夾心法:被檢測的抗原包被在兩個抗體之間,其中一個抗體將抗原固定于固相載體上,即捕捉抗體。另一個則是檢測抗體,此抗體可用酶標記后直接測定抗原的量;或不標記,再透過酶標記的二級抗體來測定抗原的量。這兩種抗體必須小心選取,才可避免交互反應或競爭相同的抗原結合部位。

優勢:高靈敏、高專一性,抗原無須事先純化。

劣勢:抗原一定得擁有兩個以上的抗體結合部位。

三、直接法:將抗原直接固定在固相載體上,加入酶標記的一級抗體,即可測定抗原總量,此一級抗體的特異性非常重要。

優勢:操作手續簡短,因無須使用二抗可避免交互反應。

劣勢:試驗中的一抗都得用酶標記,但不是每種抗體都適合做標記,費用相對提高。

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